树突状细胞（Dendritic Cell，简称DC）
作为哺乳动物体内的一种白细胞，扮演着至关重要的角色。它不仅是抗原呈递细胞（APC），更在先天性免疫和适应性免疫中发挥着承上启下的作用。在炎症反应中，DC细胞能够高效地加工、处理并递呈抗原，随后成熟并迁移至淋巴组织，将外来物质呈递给初始T细胞。这些初始T细胞进而被激活，分化为具有细胞毒性的CD8+T细胞或CD4+T辅助细胞。而在非炎症条件下，DC细胞的抗原呈递作用同样不容忽视。它们通过呈递自身抗原或无害的环境抗原，诱导调节性T细胞的分化或自身反应性免疫细胞的失活，从而在新型疫苗开发和自身免疫性疾病预防中发挥关键作用。本文将深入探讨小鼠DC细胞的分化过程，并介绍相关的流式检测及磁珠分选方法，以期为科研人员提供有益的参考。
图1. 小鼠DC细胞的分化
转录组数据揭示，在小鼠骨髓中，造血干细胞（HSC）会分化为共同淋系祖细胞（CLP）和共同髓系祖细胞（CMP）。其中一部分CMP在表达FLT3L后，会进一步分化成巨噬细胞和DC祖细胞（MDP）。MDP被视为共同DC祖细胞（CDP）和单核细胞祖细胞（cMop）的直接前体，其分化路径最终将产生DC系列的多个亚群。
小鼠DC祖细胞（CDPs）的分化路径包括经典DC（cDC）和浆细胞样DC（pDC）。在骨髓中，FLT3L等生长因子会诱导CDP分化为pre-cDC，这些pre-cDC随后被释放到血液中，以迁移至外周和淋巴器官并进一步分化为成熟的cDC。pre-cDC可分化成为两种cDC亚型：cDC1或cDC2细胞。而pDC则是在骨髓中，由CDP在转录因子Irf8和TCF4(E2-2)的调控下持续产生的。
此外，研究还发现了具有pDC和cDC2表型和特征的一种“过渡”DC（tDC）亚群。在炎症环境下，某些单核细胞亚群也能分化为单核细胞衍生的DC（Mo-DC）。这些发现为我们深入理解小鼠DC细胞的分化过程提供了重要的线索。
图2. 小鼠DC细胞的表型标记
为了方便科研人员研究小鼠DC细胞，我们整理了现有的小鼠DC细胞及其在淋系组织、肺部、肠道、皮肤组织上的表型标记。这些标记指标将有助于您快速查找并应用于相关实验中，从而推动您在小鼠DC细胞领域的研究进展。
图2. 小鼠不同组织上DC细胞的标记
小鼠DC细胞的流式分析：以皮下淋巴结样本为例
在研究小鼠DC细胞时，流式分析是一种常用的技术手段。通过这种方法，我们可以对特定组织中的DC细胞进行深入的分析和标记。以皮下淋巴结样本为例，我们可以利用特定的抗体和荧光染料来标记和区分不同类型的DC细胞，从而了解它们在体内的分布、数量和功能状态。这种流式分析技术不仅为小鼠DC细胞的研究提供了有力的工具，也为其他相关领域的研究带来了新的突破。
图3. 小鼠DC细胞的流式分析
作者通过酶消化法将小鼠腹股沟淋巴结制备成单细胞悬浮液。在排除细胞碎片、双细胞和死细胞后，作者首先圈选出活CD45+细胞（图3.A）。接着，为进一步纯化淋巴细胞，作者排除了CD19+MHC-II+B细胞、NK1.1+NK细胞和T细胞，其中CD3+T细胞被进一步细分为CD4+和CD8+T细胞亚群（图3.B）。随后，作者在非淋巴细胞中区分出pDC细胞群（pDCA-1+Ly-6C+）、单核细胞（Ly-6C+Ly-6G-）和中性粒细胞（Ly-6C+Ly-6G+）。通过CD11b与CD11c的进一步分析，作者将DC与非DC骨髓细胞成功分开（图3.C）。在CD11c+群体中，作者发现MHC-II+DC，这些DC又可分为迁移性DC（Migratory DC，MHC-IIhighCCR7+）和驻留性DC（Resident DC, MHC-II+CCR7-）（图3.D）。迁移性DC由cDC1（XCR1+CD172a-）、CD103-和CD103+亚群，以及cDC2（CD24-CD207-）和LC（CD24+CD207+）组成（图3.E）。在驻留性DC中，作者观察到XCR1表达CD103–和CD103+的两个cDC1亚群，而cDC2则分为CD172a-XCR1-DN DC，以及表达CD11b–和CD11b+的两个cDC2亚群（图3.F）。
接下来，我们将探讨如何对DC细胞进行分选。
图4. 使用MojoSort™ Mouse Pan Dendritic Cell Isolation Kit分选小鼠细胞DC细胞的分选前后对比
为了进一步研究DC细胞，我们提供了MojoSort™ Mouse Pan Dendritic Cell Isolation Kit，它能够高效且轻柔地富集小鼠的泛树突状细胞，包括cDC和pDC。通过酶消化法，我们制备了C57BL/6小鼠脾脏的单细胞悬液，并利用该试剂盒进行分选。随后，通过Helix NP™ Blue排除了死细胞，并使用Mouse PE CD11c和Mouse APC CD317进行流式染色。结果显示，经过分选后，cDC的纯度从7.78%显著提升至61.7%，而pDC的纯度也从0.5%提升至5.38%。这一显著提升将为DC细胞的研究提供更为纯净的样本。此外，我们也提供人和小鼠的DC细胞MojoSort™磁珠分选产品，以满足不同研究的需求。
