现代生物技术均通过细胞作为载体来进行,细胞培养被广泛应用于细胞生物学科和医学研究的各个领域,如疫苗生产,基因药物生产 ,临床用单抗等。在细胞培养的过程中,培养基尤为重要。
培养基既是供给细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和增殖的环境,所以非常重要。细胞培养基是建立在平衡盐溶液基础上,添加了碳水化合物、氨基酸、脂类、无机盐、维生素、微量无素和细胞生长因子等。那么,常用的培养基有哪些呢?它们的成分和特点是什么呢?它们各自的适用范围又有哪些呢?
四种最常见的细胞培养基
MEM培养基
MEM(Minimum Essential Medium),外号是应用最广泛的细胞培养基。顾名思义,MEM可以用于绝大多数的细胞,特别适合于很多种哺乳动物细胞培养。
MEM中含有13种必须氨基酸、8种维生素、以及多种微量元素,在细胞培养基赛道中可谓是能力全面、优点突出。
DMEM培养基
DMEM(dulbecco's modified eagle medium),看名字就知道和MEM有着千丝万缕的关系。DMEM是在MEM的基础上发展而来的,增加了原来各成分的含量。虽然DMEM与MEM的营养成分非常相似,但是DMEM的浓度要高出MEM2~4倍。
DMEM培养基分为高糖型(含葡萄糖4500mg/L)和低糖型(含葡萄糖1000mg/L)两种。高糖型有利于细胞停泊于一个位置生长,适用于生长较快,附着性较差的肿瘤细胞。常用于杂交瘤技术中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞。低糖型对于生长速度较快、附着性差的肿瘤细胞有利。
1640培养基
相比较于DMEM,1640的营养成分比较简单,比DMEM少一点糖和谷光甘肽。
1640 培养基最初为培养小鼠白血病细胞而制备。因为其组成简单,可以适应很多种类细胞的生长,主要用于悬浮细胞培养。可适用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞,杂交瘤细胞的培养。
1640与DMEM的区别其一在于1640一般用于肿瘤细胞的培养,而DMEM用于较难养的细胞,比如正常细胞;其二1640主要用于悬浮细胞培养,DMEM适用于贴壁细胞生长,如各种实体瘤贴壁细胞。
F12培养基
F12培养基(Ham‘s F 12 nutrient medium)是动物细胞培养基,最初开发用于支持CHO、Hela和L-细胞生长,F-12还用于培养原代大鼠肝细胞和前列腺上皮细胞增值。其成分复杂,包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂(例如核苷酸)。
但是,F12中含有硫酸亚铁,有神经毒效应,对于很多神经细胞是有毒性作用的。
值得一提的是,F12和MEM 这两种培养基各取1/2,就成为了神经生物学最通用的培养基,已经成功的培养了外周神经元。