CD96(Cluster of Differentiation 96)是一种细胞表面蛋白,属于Ig超家族的成员之一。以下是CD96重组蛋白(艾普蒂生物现货目录号:PA1000-6087)的基本信息:
基因和基因位置: CD96基因位于人类染色体3上,基因名称为CD96。它编码的蛋白是一种跨膜糖蛋白。
分子结构: CD96蛋白包含多个结构域,其中包括一个Ig-like(免疫球蛋白样)结构域,一个唾液酸结合结构域,一个C-type(C型)凝集素结构域以及一个跨膜区和一个胞内结构域。这种结构使得CD96具有细胞表面分子相互作用的能力。
功能: CD96被认为是一种与免疫调节和细胞黏附相关的蛋白。它在免疫细胞之间的相互作用中可能发挥着重要的调节作用,特别是在T细胞和抗原呈递细胞之间的相互作用中。
配体: CD96的主要配体是T细胞表面的TIGIT(T cell immunoreceptor with Ig and ITIM domains)蛋白。TIGIT是一种免疫检查点蛋白,参与了调节T细胞的活化和耐受性。
生理功能: CD96与TIGIT之间的相互作用可能调控T细胞的活化状态,并影响免疫应答。这一相互作用可能对调节免疫细胞之间的相互作用和免疫耐受性至关重要。
通过实验研究CD96重组蛋白(艾普蒂生物现货目录号:PA1000-6087)在T细胞活化和免疫调节中的作用,以深入了解其在免疫应答中的功能机制。
1.1 基因克隆: 从适当来源(如人类T细胞)中提取CD96基因。
1.2 表达载体构建: 将CD96基因插入适当的表达载体中,如pET、pcDNA3.1等。
1.3 细胞转染: 将构建好的表达载体转染至合适的宿主细胞,如HEK293细胞。
1.4 表达与纯化: 在适当的条件下,表达CD96蛋白(艾普蒂生物现货目录号:PA1000-6087),并通过亲和层析等方法纯化蛋白。
2.1 T细胞培养: 使用适当的T细胞系,如Jurkat细胞,细胞在培养皿中培养至适当密度。
2.2 CD96重组蛋白处理: 将不同浓度的CD96蛋白加入培养基,处理T细胞。
2.3 T细胞活化测定: 通过检测T细胞表面标记物的表达,如CD69、CD25等,评估CD96重组蛋白对T细胞的活化效应。
3.1 T细胞激发: 使用适当的T细胞激发剂,如抗CD3/CD28抗体,刺激T细胞进行免疫调节。
3.2 CD96重组蛋白处理: 在激发的条件下,加入不同浓度的CD96蛋白,观察其对T细胞免疫调节的影响。
3.3 细胞因子检测: 使用ELISA等方法检测细胞因子水平,如IL-2、IFN-γ等,评估CD96重组蛋白对免疫调节的调控效应。
4.1 CD96蛋白处理: 处理T细胞后,收集细胞,提取蛋白。
4.2 Western blot: 使用特异性抗体进行Western blot分析,研究CD96重组蛋白在T细胞信号通路中的影响,如MAPK、NF-κB等。
5.1 T细胞活化和免疫调节实验数据: 统计CD96蛋白处理组与对照组的相关指标,绘制图表进行比较。
5.2 信号通路分析数据: 分析Western blot结果,评估CD96在信号通路中的调控效应。
通过上述实验,可以深入了解CD96重组蛋白在T细胞活化和免疫调节中的作用机制,为进一步研究其在免疫应答和相关疾病治疗中的潜在应用提供实验基础。