用途

倒置荧光显微镜是一种常用的生物实验室仪器，用于观察细胞和组织的荧光标记和染色情况。在倒置荧光显微镜下，我们可以清晰地观察到细胞的转染情况。转染是指将外源性DNA导入真核细胞中的过程，常用于基因表达、基因敲除等研究。

在倒置荧光显微镜下进行细胞转染时，通常需要使用荧光染料对细胞进行染色。荧光染料是一种能够吸收特定波长的光，并发出另一种波长的光的物质。不同的荧光染料具有不同的激发波长和发射波长，因此可以用于不同的实验目的。

GFP是一种常用的荧光染料，可以自发地发出绿色荧光。在细胞转染中，GFP常用于标记转染的细胞，以便在倒置荧光显微镜下观察细胞的转染情况。

RFP是一种能够发出红色荧光的荧光染料。与GFP相比，RFP的激发波长和发射波长更为接近红色激光，因此在某些实验中可以更好地抵抗背景干扰。

DAPI是一种能够与DNA结合的荧光染料，可以发出蓝色荧光。在细胞转染中，DAPI常用于染色细胞的核，以便在倒置荧光显微镜下观察细胞的形态和核质比。

FITC是一种能够发出绿色荧光的荧光染料，常用于标记蛋白质、抗体等生物分子。在细胞转染中，FITC可以用于标记某些蛋白质或抗体，以便在倒置荧光显微镜下观察其在细胞内的分布和定位。

在倒置荧光显微镜下进行细胞转染时，通常需要遵循以下步骤：

1. 准备转染试剂和细胞：选择适合的转染试剂，如脂质体、聚合物等，并准备适量的细胞。
2. 制备转染液：将外源性DNA与转染试剂混合，加入适量的培养基，制备成转染液。
3. 转染细胞：将转染液加入细胞中，轻轻混匀，使细胞充分吸收转染液。
4. 培养细胞：将转染后的细胞放置在适宜的培养条件下培养，以便外源性DNA在细胞内表达。
5. 观察细胞：在倒置荧光显微镜下观察细胞的转染情况，记录细胞的形态、染色情况等信息。

在选择荧光染料时，需要考虑其激发波长和发射波长、稳定性、渗透性等因素。同时，还需要注意荧光染料的浓度和作用时间对细胞的影响。


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仪器配置