Dihydroethidium (二氢乙锭，DHE)是一种超氧化物阴离子荧光探针，在细胞质中具有蓝色荧光，二氢乙锭（也称为氢乙锭）是常用 DNA 染料溴化乙锭的化学还原形式。Dihydroethidium探针 可用于检测活细胞中的氧化活性，包括吞噬细胞中的呼吸爆发。(λEx/λEm=518/616 nm).二氢乙锭在细胞质中呈现蓝色荧光直至被氧化，然后插入细胞 DNA 中，使细胞核染成明亮的荧光红色。

图1.Dihydroethidium (二氢乙锭，DHE)分子结构

图2.基于二氢乙锭和MitoSOX红氧化的ROS检测方法背后的化学原理。形成乙锭的非特异性氧化比导致形成2-羟基乙锭的超氧阴离子诱导反应占主导地位。值得注意的是，两种氧化副产物都表现出重叠的荧光特性。

Dihydroethidium (二氢乙锭，DHE)分子结构使用案例

图3. 二氢乙锭用于检测肝组织中ROS的产生。

方法：

1.制备每组（5μm厚）的冷冻肝组织切片并与二氢乙锭（7.5mM;30分钟;37°C;黑暗）孵育。

2.使用荧光显微镜（徕卡，德国）观察切片，并通过定量形态分析计算二氢乙锭阳性细胞的百分比。