药敏试验
1、概念: 测定抗感染药物在体外对病原微生物有无抑菌或杀菌作用的方法称为药物敏感性试验,简称药敏试验。
2、目的:检测可能引起感染的细菌对一种或多种抗菌药的敏感性。
3、结果判断标准: 目前我国药敏试验判断标准参照CLSI标准文件,CLSI文件是我国的卫生部部颁文件。
MIC(minimal inhibitory concentration ,最小抑菌浓度)
1、概念:是指在体外试验中,抗菌药物能抑制培养基中细菌生长的最低药物浓度。是抗菌药抗菌活性指标,显示出药物抑制病原微生物的能力。
2、CLSI文件中关于敏感、中介、耐药的定义
Ø 敏感:最高血药浓度>4倍MIC,使用常规剂量有效;
Ø 中介:最高血药浓度≈MIC,加大剂量或药物浓缩部位有效;
Ø 耐药:最高血药浓度<MIC,无效。
抗生素的等效性与抗菌谱
1、抗生素的等效性:是指用一种相关抗生素的试验结果预测同类抗生素体内抗菌活性。如头孢噻吩与其他一代头孢具有等效性,可用头孢噻吩结果预测其他一代头孢。此特性允许检测少数几种抗生素而不影响临床对其他抗生素广泛选择。
2、抗菌谱:是指细菌在“野生菌”状态下能被抗生素在体内达到有效浓度时抑制的种类。这些细菌称为对该抗生素的天然敏感菌。未列在抗菌谱中的细菌则为天然耐药菌。
细菌的耐药性
1、 细菌耐药性:是细菌抵抗抗菌药物杀菌、抑菌作用的一种防御能力,一种生物学的表型。
2、 天然耐药(固有耐药):耐药性为某种细菌固有的特点称细菌的天然或固有耐药性。天然耐药非常稳定,据此就可预测某一细菌或可能存在的细菌对某种抗生素是否耐药。
3、 获得性耐药:由于细菌获得耐药基因,使原来敏感的细菌变为耐药称细菌的获得性耐药。获得性耐药是目前临床面临的最主要的耐药问题。由天然敏感菌基因突变或获得一段基因片段,使其基因型改变而产生耐药。获得性耐药不断在变化(其变化频率与抗生素应用相关),不能预测,需要做药敏试验。
药敏试验报告解读的几个问题
1 .药敏试验报告中S、I、R 指的是什么?
S(susceptible),是指细菌对抗菌药敏感,使用常规剂量时的平均血浓度超过MIC 5倍以上,用常规剂量通常有效;I(intermediate)是指细菌对抗菌药中度敏感,常规剂量时平均血浓度等于或略高于MIC,需用高剂量或对体内药物浓缩部位的感染可能有效;R(resistance)是指细菌对某种抗菌药耐药,药物对细菌的MIC 高于应用常规剂量时的血浓度,应用常规剂量治疗通常无效。
2 .细菌药敏试验是如何测定的?
根据美国临床实验室标准委员会(The National Committee for Clinical Laboratory Standards , NCCLS )推荐的纸片扩散法(即Kirby-Bauer法)测定。将含有一定量抗菌药的纸片贴在涂有细菌的琼脂平板表面,35℃ 培养过夜,测量纸片周围抑菌圈的大小确定细菌对药物的敏感性,抑菌圈越大敏感性越高。不同细菌对不同抗菌药敏感性的判定标准不同,例如头孢噻肟对肠杆菌科细菌的抑菌圈≤14mm为R, 15mm-22mm为I,≥23mm为S;苯唑西林对金黄色葡萄球菌抑菌圈≤10mm为R, 11mm-12mm为I, ≥13mm为S。
3 .药敏试验中,测试抗菌药物的品种是如何选定的?
抗菌药有近200种,药敏试验中没必要也不可能包括每种抗菌药。所测试的抗菌药纸片的种类是根据各类细菌对抗菌药的敏感性及临床可能选用的药物而确定的,同类药物通常只选择1-2个代表品种。NCCLS对各种细菌的药敏试验中宜测试的药物品种进行了推荐,如测定葡萄球菌属的药敏试验应包括苯唑西林、青霉素、红霉素、克林霉素、复方磺胺甲噁唑(SMZ-TMP) 和万古霉素;此外可根据情况增加其他品种如氯霉素、环丙沙星、庆大霉素、利福平和呋喃妥因等。
4 .为什么肠球菌属细菌药敏报告的测定药物这么少?
对头孢菌素类和多种抗菌药天然耐药,故药敏试验中所包括的抗菌药品种较少,NCCLS 推荐的测试品种为氨苄西林或青霉素、万古霉素(去甲万古霉素),此外亦可增加庆大霉素、氯霉素、红霉素、利福平、环丙沙星和呋喃妥因等,后两者适用于尿标本。
5 .细菌对多种抗菌药物敏感时.如何选择最有效药物?
应根据感染部位、病情严重程度、药物的抗菌作用及药动学特点选择抗菌药。
6 .是否所有阳性培养均有临床意义?
并非所有阳性培养都是真正的病原菌,原因可能有:
① 所报告细菌为污染菌,细菌培养结果的临床意义大小与所取标本有关,如为关节液、胸腔积液、血液等无菌标本则临床意义较大,但即使血培养阳性也可能为污染菌,据报道单次血培养凝固酶阴性葡萄球菌、草绿色链球菌、肠球菌阳性,污染可能性分别为85 %、52 %、22 %。某些标本易受污染如痰标本易于受咽喉部携带菌的污染,尿培养易受下尿道、尿道口寄居菌污染。
② 可能为应用抗菌药后的菌群交替,特别是原为复数菌感染时,针对优势菌治疗一段时间后可能非优势上升为优势菌,广谱抗菌药治疗后可能出现真菌感染,故使用抗菌药时间较长的感染,疗程中需复查细菌培养。此外影响临床疗效的因素很多,据报道药敏试验结果与临床疗效的符合率约为70% ,因此细菌培养及药敏试验报告只能作为临床用药的参考,应根据患者用药后的治疗反应和临床病情调整用药。