方法原理 样品在加速剂的参与下，用浓硫酸消煮时，各种含氮有机化合物，经过复杂的高温分解反应，转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。碱化后蒸馏出来的氨用硼酸吸收，以标准酸溶液滴定，求出土壤全氮含量（不包括全部硝态氮）。

包括硝态和亚硝态氮的全氮测定，在样品消煮前，需先用高锰酸钾将样品中的亚硝态氮氧化为硝态氮后，再用还原铁粉使全部硝态氮还原，转化成铵态氮。

在高温下硫酸是一种强氧化剂，能氧化有机化合物中的碳，生成CO，从而分解有机质。

样品中的含氮有机化合物，如蛋白质在浓HSO。的作用下，水解成为氨基酸，氨基酸又在HSO。的脱氨作用下，还原成氨，氨与硫酸结合成为硫酸铵留在溶液中。

Se的催化过程如下∶

由于Se的催化效能高，一般常量法Se粉用量不超过0.1～0.2g，如用量过多则将引起氮的损失。

以Se作催化剂的消煮液，也不能用于氮磷联合测定。硒是一种有毒元素，在消化过程中，放出HSe。HSe的毒性较HS更大，易引起人中毒。所以，实验室要有良好的通风设备，方可使用这种催化剂。

CuSO。的催化作用如下∶

当土壤中有机质分解完毕，碳质被氧化后，消煮液则呈现清澈的蓝绿色即“清亮”，因此硫酸铜不仅起催化作用，也起指示作用。同时应该注意开氏法刚刚清亮并不表示所有的氮均已转化为铵，有机杂环态氮还未完全转化为铵态氮，因此消煮液清亮后仍需消煮一段时间，这个过程叫“后煮”。

消煮液中硫酸铵加碱蒸馏，使氨逸出，以硼酸吸收之，然后用标准酸液滴定之。

蒸馏过程的反应:

滴定反应过程：

主要仪器:

消煮炉、半微量定氮蒸馏装置（图 4-2）、半 微 量 滴 定 管(5mL)。

试剂：

（1）硫酸。p=1.84g10mL一，化学纯

（2）10mol·L-1NaOH溶液。称 取 工 业 用 固 体NaOH420g，于硬质玻璃烧杯中，加蒸馏水400mL溶解，不断搅拌，以防止烧杯底角固F结，冷却后倒入塑料试剂瓶，加塞，防止吸收空气中的CO2，放置几天待Na2CO沉降后，将清液虹吸入盛有约160mL无

测定步骤：

（1）称取风干土样（通过0.149mm筛）1.0000g【含氮约1mg/*2）】，同时测定土样水分含量。

（2）土样消煮。

①不包括硝态氮和亚硝态氮的消煮∶将土样送入干燥的开氏瓶（或消煮管）底部，加少量无离子水（0.5～1mL）湿润土样后（*3），加入加速剂2g和浓硫酸5mL，摇匀，将开氏瓶倾斜置于300W变温电炉上，用小火加热，待瓶内反应缓和时（10～15min），加强火力使消煮的土液保持微沸，加热的部位不超过瓶中的液面，以防瓶壁温度过高而使铵盐受热分解，导致氮素损失。消煮的温度以硫酸蒸气在瓶颈上部1/3处冷凝回流为宜。待消煮液和土粒全部变为灰白稍带绿色后，再继续消煮1h。消煮完毕，冷却，待蒸馏。在消煮土样的同时，做两份空白测定，除不加土样外，其他操作皆与测定土样相同。

②包括硝态和亚硝态氢的消煮∶将土样送入干燥的开氏瓶（或消煮管）底部，加高锰酸钾溶液1mL，摇动开氏瓶，缓缓加入1∶1硫酸2mL，不断转动开氏瓶，然后放置5min，再加入1滴辛醇。通过长颈漏斗将0.5g（±0.01g）还原铁粉送入开氏瓶底部，瓶口盖上小漏斗，转动开氏瓶，使铁粉与酸接触，待剧烈反应停止时（约5min），将开氏瓶置于电炉上缓缓加热45min（瓶内土液应保持微沸，以不引起大量水分丢失为宜）。停火，待开氏瓶冷却后，通过长颈漏斗加加速剂2g和浓硫酸5mL，摇匀。按上述①的步骤，消煮至土液全部变为黄绿色，再继续消煮1h。消煮完毕，冷却，待蒸馏。在消煮土样的同时，做两份空白测定。

（3）氨的蒸馏。

①蒸馏前先检查蒸馏装置是否漏气，并通过水的馏出液将管道洗净。、②待消煮液冷却后，用少量无离子水将消煮液定量地全部转入蒸馏器内，并用水洗涤开氏瓶4～5次（总用水量不超过30~35mL）。若用半自动式自动定氮仪，不需要转移，可直接将消煮管放入定氮仪中蒸馏。于150mL锥形瓶中，加入20g·L~'硼酸—指示剂混合液5mL（*4），放在冷凝管末端，管口置于硼酸液面以上3～4cm处（E5）。然后向蒸馏室内缓缓加人10mol·L-INaOH溶液20mL，通入蒸汽蒸馏，待馏出液体积约50mL时，即蒸馏完毕。用少量已调节至pH4.5的水洗涤冷凝管的末端。

③用0.01mol·L-1（-HSO）或0.01mol·L-1HCl标准溶液滴定馏出液由蓝绿色至刚变为紫红色。记录所用酸标准溶液的体积（mL）。空白测定所用酸标准溶液的体积，一般不得超过0.4mL。

结果计算：

两次平行测定结果允许绝对相差土壤含氮量大于1.0g·kg 时，不得超过0.005%含氮1.0～0.6gkg 时，不得超过0.004%含氮<0.6g·kg 时，不得超过0.003%。4.1.2.2.6

注释：

注1.对于微量氮的滴定还可以用另一更灵敏的混合指示剂，即0.099g溴甲酚绿和0.066g甲基红溶于100mL乙醇中。如要配制成20g·L-HgBO3——指示剂溶液称取硼酸（分析纯）20g溶于约950mL水中，加热搅动直至HgO溶解，冷却后，加入混合指示剂20mL混匀，并用稀酸或稀碱调节至紫红色（pH约5），加水稀释至1L混匀备用。宜现配。

注2.一般应使样品中含氮量为1.0～2.0mg，如果土壤含氮量在2g·kg 1 以下，应称土样1g；含氮量在2.0～4.0g·kg-’者，应称0.5～1.0g；含氮量在4.0gkg--以上者应称0.5g。

注3.开氏法测定全氮样品必须磨细通过100孔筛，以使有机质能充分被氧化分解，对于粘质土壤样品，在消煮前须先加水湿润使土粒和有机质分散，以提高氮的测定效果。但对于砂质土壤样品，用水湿润与否并没有显著差别。

注4.硼酸的浓度和用量以能满足吸收NH为宜，大致可按每毫升10g·L-IHBO能吸收氮（N）量为0.46mg计算，例如20gL-HBO溶液5mL 最多可吸收的氮（N）量为5×2×0.46=4.6mg。因此，可根据消煮液中含氮量估计硼酸的用量，适当多加。

注5.在半微量蒸馏中，冷凝管口不必插入硼酸液中，这样可防止倒吸减少洗涤手续。但在常量蒸馏中，由于含氮量较高，冷凝管须插入硼酸溶液，以免损失。