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这是医业观察公众号的第1057-2期文章
作者:iAnny
来源:IVD学习笔记
2021年4月12日,意大利体外诊断公司DiaSorin(索灵)宣布以18亿美元全资收购美国Luminex公司,引起了中国诊断行业和投资圈的广泛关注,作为一家老牌IVD企业,luminex自身老牌企业科研和诊断通吃,免疫和分子通吃。
Luminex公司成立于1995年,总部位于美国德克萨斯州的奥斯汀,于2000年在美国纳斯达克上市,是一家专门致力于研发和生产生物化验分析仪器并将其运用于生命科学领域的公司。公司的xMAP(multi-analyte profiling)多重解决方案包括开放式结构的多重分析技术平台,能带来快速、准确、经济的分析结果,被广泛应用于制药开发、临床诊断和生物研究。
Luminex的代表产品 Luminex 100/200以及新推出的FLEXMAP 3D多功能式点阵仪都是基于xMAP技术原理,整合了荧光编码微球、激光检测、应用流体学、最新的高速数字信号和计算机运算法则等多项技术,真正实现了“高通量”检测,并荣获2005年度国际临床诊断技术革新奖。是唯一得到美国FDA批准的,也是唯一被纳入美国临床实验室质控网络的高通量诊断技术。被国际业界专家评价为临床诊断的趋势性技术之一。目前,Luminex有68家商业许可签约伙伴(38家诊断,30家科研)。
1、xMAP技术 (Multi-Analyte Profiling)
xMAP技术,在国内又称为“液相悬浮芯片技术”、“多功能流式点阵技术”、“液相芯片分析技术”、“流式荧光检测技术”、“多功能多指标并行分析技术”、“(微球)悬浮阵列技术”等。其技术原理为用不同配比的两种红色分类荧光染料将直径为 5.6 微米的聚苯乙烯微球染成不同的荧光色,从而获得多达 100 种荧光编码的微球。把针对不同待测物的抗体分子或者基因探针以共价交联的方式结合到特定的编码微球上,每个编码微球都对应相应的检测项目。先把针对不同待测物的荧光编码微球混合,然后加入待测物质或者待测的扩增片段,所形成的复合物再与标记荧光素发生结合反应。微球在流动鞘液的带动下单列依次通过红绿激光,红激光用来判定微球的荧光编码,绿激光用来测定微球上报告分子的荧光强度。从而达到快速准确的定量检测目的。
技术优势:
检测更多的生物标志物。
开发定制项目
样品用量少
节省时间和试剂
2、xTAG 技术
此技术使用 Luminex 专有的通用标签,通过标签序列与反标签序列的专一性互补配对,进行核酸实验优化,产品开发和分子诊断化验。xTAG技术能保证相同的复性温度和杂交效率,且有效避免不同检测物标记的微球之间交叉杂交。xTAG 技术结合 Luminex 相关仪器,能为临床多重基因检测提供最好的解决方案,包括感染染性疾病和基因检测相关的临床诊断检测试剂。Luminex 公司自行开发的很多临床检测试剂盒,比如呼吸道病毒检测试剂盒 (RVP) 和囊性纤维化 (Cystic Fibrosis) 检测试剂盒,都应用了 xTAG 技术,并获得美国食药监局 FDA 的批准文号。
Luminex xTAG 技术产品提供准确、灵活、低成本的微球阵列,它们结合了多达150种核酸检测的任何组合,在单个反应中进行多重检测。luminex拥有基于此技术开发的NxTAG 23种呼吸道病原体新型多重检测试剂盒(RUO)。
xTAG 技术实验原理为:
首先经过 PCR 反应扩增待测核酸,扩增的 DNA 与短序列 TAG 引物混合,若目标存在,则发生目标特异性引物延伸并同时掺入标记物;
然后加入连有反 -TAG 序列的微球通过互补配对来特异性识别目标引物。
微球在流动鞘液的带动下单列依次通过红绿激光,使用激光或LED灯读取偶联有特定核酸序列的颜色编码的微球进行检测。
xTAG 测试在 Luminex xMAP 系统上运行,使用激光或LED灯读取偶联有特定核酸序列的颜色编码的微球进行检测。
xTAG 技术实验原理
技术优势:
序列已优化,以尽量减少交叉杂交,从而防止多重核酸分析中的串扰
仅使用三个碱基(TAG),防止与天然序列杂交
等温杂交可避免在必须选择自己的序列时出现较长的实验设计和测试时间
3、MultiCode-RTx 技术
Luminex的 MultiCode 产品 为基于实时PCR和多重 PCR 的检测提供了一个灵活的平台。MultiCode 产品基于独特的专利的MultiCode 碱基 isoC 和 isoG。合成的 isoC:isoG DNA 碱基对的氢键结合方式有别于天然存在的碱基对。其结果是,MultiCode 碱基 isoC 和 isoG 只能彼此相互进行碱基配对。此特性使得 iso 碱基在扩增过程中可进行位点特异性结合。
MultiCode-RTx isoC 和 isoG配对(划横线部分为更换后基团)
IsoC 和 isoG 碱基是Luminex 下一代基于核酸的MultiCode 检测试剂的基石。基于MultiCode 的PCR 检测试剂可高特异性的用于传染性疾病和基于遗传基因的早期检测。
MultiCode技术相关详细介绍请见文章:Luminex MultiCode-RTx 技术解析,如何进行多重PCR检测
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