一、葡萄球菌属
1、细菌菌落形态及色素的观察:
普通培养基上形成直径2~3mm不透明的圆形凸起菌落,如图:
菌落表面光滑,边缘整齐,如图:
可产生金黄色、白色、柠檬色等脂溶性色素附着在菌落上,金黄色葡萄球菌可产生金黄色素,血琼脂平板上菌落周围有透明溶血环(β-溶血),如下图:
能在含10%~15% NaCl琼脂中生长,甘露醇高盐平板上为黄色菌落。
2、镜下形态的观察:
为革兰阳性球菌,散在或不规则葡萄状排列,无芽孢无荚膜,如下图:
二、链球菌属
1、细菌菌落形态及溶血的观察:
灰白色、圆形凸起、表面光滑、边缘整齐的针尖样大小菌落,
菌落周围出现不同的溶血,根据血平板上的溶血情况分:
①甲型(α):草绿色溶血环,见下图:
②乙型(β):透明溶血环。见下图:
③丙型(γ):无溶血环,见下图:
肺炎链球菌的菌落与甲型链球菌相似,但培养2~3天后,因菌体发生自溶,菌落中性凹陷呈“脐状”,如下图:
2、细菌镜下形态观察:
为革兰阳性球菌、圆形或卵圆形、成双或呈链状排列。链的长度因菌种和培养基而又明显差异,一般在液体培养基中易形成长链,如下图:
肺炎链球菌为矛头状、成双排列的革兰阳性球菌;荚膜染色:菌体周围有空晕,此为荚膜。
三、奈瑟菌属
1、培养特性和菌落观察:
营养要求高,接种血平板或巧克力平板,置35℃ ,5%CO2条件下,孵育18~24h观察结果,可见圆形突起、光滑湿润、无色透明、边缘整齐、似露滴状 ,直径为2~3mm,如下图:
脑膜炎奈瑟菌于孵育24小时后在培养基上发生自溶。
淋病奈瑟菌为圆形突起、半透明或不透明、无色或灰白色、边缘整齐、直径0.5~1.0 cm的小菌落,如下图:
2、细菌镜下形态:
革兰阴性双球菌,菌体直径0.6~1.5μm,形似双肾或咖啡豆样,凹面相对,如下图:
临床标本,细菌多在吞噬细胞内。
四、大肠埃希菌
1、菌落观察:
在普通琼脂平板上呈圆形、灰白色、湿润、光滑型菌落;在血琼脂平板上呈圆形、灰白色、湿润、光滑型菌落,如下图:
在SS/MAC琼脂平板上呈红色、圆形、凸起、边缘整齐的菌落,多数为光滑型菌落,如下图:
2、形态结构观察:
革兰阴性、中等大小、两端钝圆、多呈单个散在分布的杆菌。鞭毛染色为周毛菌。如下图:
肠杆菌科细菌的形态十分相似,很难区分;故其他肠杆菌科细菌的形态结构,后面不再重复。
五、志贺菌属
1、菌落观察:
在SS和MAC平板上形成无色透明、中等大小的菌落,如下图:
除宋内氏志贺菌外,菌落均为光滑型。
2、形态结构观察:
为革兰阴性杆菌,散在分布,多无鞭毛
六、伤寒沙门菌属
1、菌落观察:
在SS和MAC平板上形成无色、半透明、光滑湿润、凸起的小菌落,与志贺菌类似;
产硫化氢的菌种可在SS平板上形成中心带黑褐色的小菌落,如下图:
2、形态结构观察:
沙门菌属为革兰阴性细长杆菌,鞭毛染色可见周鞭毛。
七、肺炎克雷伯菌
1、菌落观察:
在血琼脂平板上形成圆形、凸起、灰白色、不溶血、光亮的大菌落,相邻菌落易于融合,黏液状,如下图:
若用接种针蘸取呈长丝状拽起,如下图:
在SS/MAC平板上呈乳糖发酵产酸的菌落,即红色、较大、浑浊、凸起的粘液型菌落,较大肠埃希菌大,如下图:
2、形态结构观察:
为无芽孢革兰阴性杆菌,呈卵圆形或球杆状,常呈双排列,无鞭毛。
八、变形杆菌
1、菌落观察:
在营养琼脂平板/血平板上呈波纹状迁徙生长现象,见不到明显的菌落,如下图:
对于临床标本,还可见这样的现象,即培养基表面似乎覆盖了一层薄雾,如下图:
在SS/MAC琼脂平板上呈无色、圆形、中等大小的乳糖不发酵型菌落,中心通常为灰褐色,如下图(中心不是黑色的,则不是变形杆菌):
2、形态结构观察:
革兰阴性杆菌,两端钝圆,有明显的多形性,呈球形或丝状;周身鞭毛,运动活泼、无芽孢、无荚膜。
九、铜绿假单胞菌
1、培养特点及菌落特征:
在普通琼脂平板上形成圆形、大小不一、边缘不整齐、扁平、光滑、湿润而常呈融合状态的菌落,并产生特征性的蓝绿色水溶性绿脓素和黄绿色青脓素,如下图:
血平板上形成大而扁平,湿润,边缘不齐,有金属光泽,有生姜气味的灰绿色菌落,并形成透明溶血环,如下图:
SS平板上形成类似沙门菌的乳糖不发酵菌落,较浑浊,48h后菌落中央也呈绿色;MAC平板上可形成微小、半透明菌落,48h后菌落中央常呈绿色。
2、形态结构观察:
为革兰阴性杆菌,菌体长短不一,常呈多形性,如下图:
不染色标本的动力观察:运动活跃;鞭毛染色,一端有1~3根鞭毛。
十、不动杆菌(以鲍曼不动杆菌为例)
1、菌落观察:
在血平板上形成圆形、凸起光滑、边缘整齐、不透明、灰白色、有粘性的菌落,不溶血;其菌落较大,直径约2~3 mm,不易与肺炎克雷伯菌区别,如下图:
在MAC平板上可形成淡红色菌落,如下图:
2、形态结构观察:
为革兰阴性球杆菌,常见成对排列,无芽胞,无鞭毛,如下图:
有时候不易脱色,易误判为革兰阳性球菌。
十一、嗜麦芽窄食单胞菌
1、菌落观察:
在血琼脂、普通培养基上的菌落中等大小、圆形、光滑、湿润,产生不溶血的黄色色素,如下图:
2、形态结构观察:
为革兰阴性杆菌,端鞭毛 (1~8跟),有动力、无芽孢、无荚膜。
十二、弧菌
(一)霍乱弧菌
1、培养特点和菌落观察:
霍乱弧菌在碱性培养基上生长良好,因此常用碱性蛋白胨水(PH8.4)增菌,在选择性培养基TCBS(硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂)上菌落中等大小,光滑,湿润,呈黄色,菌落周围也呈黄色。
上图中,黄色的是霍乱弧菌,绿色的是副溶血弧菌(下述)。
2、形态结构观察:
为革兰阴性菌,弧形或逗点状,如下图:
排列似“鱼群”样,压滴法动力试验呈穿梭样运动
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(二)副溶血弧菌
1、培养特点和菌落观察:
副溶血弧菌在普通平板上生长不良,在高盐琼脂上生长良好,菌落较大,在选择性培养基TCBS(硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂)上菌落中等大小,光滑,湿润,不发酵蔗糖,因此呈绿色或蓝绿色(上述)。
2、形态结构观察:
革兰阴性菌,呈弧形、棒状、卵圆形等多形态性,排列不规则,散在或成对。
十三、炭疽芽胞杆菌
1、菌落形态:
在普通琼脂平板上可形成扁平粗糙,灰白色,不透明、无光泽、边缘不整齐的菌落,直径2~4 mm,
低倍镜下可观察到卷发状菌落,如下图
2、形态结构观察:
革兰阳性大杆菌,呈矩形,短链状或竹节状,无鞭毛,如下图:
陈旧培养物上可见芽孢小于菌体(见下图),有毒株可形成荚膜。
十四、蜡样芽胞杆菌
1、菌落形态:
在普通平板上形成圆形凸起的菌落,表面粗糙有蜡光,不透明似毛玻璃,如下图:
血琼脂平板上的菌落周围有β溶血环,如下图:
卵黄琼脂平板上的菌落周围形成乳白色浑浊环。
2、形态结构观察:
革兰阳性大杆菌,两端钝圆、短链杆状排列,无荚膜,有周鞭毛,
培养6小时后可见小于菌体的圆形芽孢。
十五、白喉棒状杆菌
1、菌落观察:
在血平板上形成白色不透明菌落,除轻型菌株的菌落有狭窄溶血环外(如下图),其余无溶血现象。
亚碲酸钾血平板上为黑色菌落(如下图);根据菌落特征及生化反应特点可将本菌分为: 重型、中间型、轻型。
在鸡蛋斜面上的菌落表现:细小灰白色而有光泽的圆形菌落。
2、形态结构观察:
典型白喉棒状杆菌为革兰阳性,一端或两端膨大呈棒状,菌体呈X/Y/W/N/M等字母形或栅栏状排列。