Worthington公司有关抗生物素蛋白的历史:

1916 年,贝特曼首先研究了生蛋清对动物的毒性作用。1927 年,Boas 证明“蛋清损伤”是由白蛋白中的一种蛋白质引起的。经确定,这种蛋白质与生物素结合形成“不可消化”复合物,不能从动物肠道或微生物从周围介质中吸收(Boas 1924、Pennington等人1942、Woolley 和 Longsworth 1942 和 Hertz 1946 )。埃金 等人。首先分离出该蛋白质并将其命名为抗生物素蛋白(Eakin等人1940a、b 和 1941)。

1963 年,Green 确定了抗生物素蛋白-生物素复合物 (10-15 M) 的解离常数,表明该复合物在体外具有J高的稳定性(Green 1963a,b)。在 1970 年代后期和 1980 年代初期,抗生物素蛋白-生物素复合物的复合物形成是生物化学和免疫细胞化学中的有用工具(Guesdon等人1979,Bayer 和 Wilchek 1980 和 Hsu等人。1981)。鸡亲和素的序列由 DeLange 和 Huang 于 1971 年确定。 cDNA 由 Gope等人克隆并测序。1987 年,Wallén等人对基因 ( avd ) 进行了克隆和测序。1995 年。

最近与抗生物素蛋白的研究发现其可用于多种癌症治疗(Lesch等人, 2010)。抗生物素蛋白及其衍生物继续用于生物素化蛋白质的分离(Bolivar等人2008),并且它已被纳入检测尿液和血清中生物素水平的试验中(Zarogiannis等人2007)。

抗生物素蛋白是一种糖蛋白,由四个相同的亚基组成。它是爬行动物、两栖动物和鸟类蛋清的次要成分。在鸡中,它在输卵管中合成以响应孕酮,并在与炎症和组织损伤有关的几种组织中合成(Elo等人1979 和 Gope等人1987)。它以高亲和力结合维生素生物素,因此被认为是对抗需要生物素的微生物的防御蛋白(Wallén等。1995)。抗生物素蛋白在配体和蛋白质之间表现出已知的最高自然亲和力(Livnah等人, 1993)。

Worthington公司抗生物素蛋白分子特征:

该蛋白质含有一个 24 个残基的信号肽。抗生物素蛋白基因 ( avd ) 由被三个内含子分开的四个外显子组成 (Wallén et al. 1995)。尽管亲和素与链霉亲和素具有几乎相同的二级、三级和四级结构,但这两种蛋白质仅显示出 30% 的序列同一性,并且被认为在进化上不相关(Laitinen等, 2006)。

抗生物素蛋白是一种基本的同型四聚体糖蛋白(Green 1964,以及 DeLange 和 Huang 1971)。碳水化合物部分是一种由四种氨基葡萄糖和五种甘露糖组成的多糖,与每个亚基的 Asn-17 相连(DeLange 和 Huang 1971)。每个相同的亚基结合一个生物素分子,色氨酸参与非共价结合。每个亚基折叠成一个八股反平行β桶,显示上下拓扑。等。1998 年)。尽管亲和素与另一种生物素结合蛋白链霉亲和素具有几乎相同的二级、三级和四级结构,但链霉亲和素没有被糖基化并且不易聚集。与链霉亲和素相比,抗生物素蛋白对非结合生物素的亲和力更高,但对结合生物素的亲和力较低(Laitinen等人, 2006 年)。

最好的抗生物素蛋白制剂每毫克蛋白质结合 15.1 g D-生物素,相当于每摩尔蛋白质结合 4 摩尔生物素。生物素的解离常数约为 10 -15 M, 比典型的抗原-抗体相互作用高约 10 3 -10 6倍(Green 1963a 和 Nardone等人。1998 年)。生物素-抗生物素蛋白复合物依赖于介质离子强度,但在较宽的 pH 范围内和对热相对稳定。

有bi要实现游离生物素的可逆或不可逆变性。pH 1.5 的氯化胍 (6-8 M) 和 120°C 的高压灭菌 (15 分钟) 是充分解离条件的示例 (Green 1970a, b)。

Worthington公司抗生物素蛋白的应用说明:

1.生物素功能研究

2.生物素是辅酶的酶的研究

3.用于亲和纯化的抗生物素蛋白或抗生物素蛋白亚基(Berger 和 Wood 1975,以及 Green 和 Toms 1973)

4.体内靶向实体瘤

Worthington公司抗生物素蛋白参考文献(部分):

Eakin, R., Snell, E., and Williams, R.: A Constituent of Raw Egg White Capable of Inactivating Biotin in Vitro, J Biol Chem 136, 801, 1940

Eakin, R., Snell, E., and Williams, R.: The Concentration and Assay of Avidin, the Injury-producing Protein in Raw Egg White, J Biol Chem 140, 535, 1941

Finn, F., Titus, G., Montibeller, J., and Hofman, K.: Hormone-Receptor Studies with Avidin and Biotinylinsulin-Avidin Complexes , J Biol Chem 255, 5742, 1980

Fraenkel-Conrat, H., Snell, N., and Ducay, E.: Avidin. I. Isolation and Characterization of the Protein and Nucleic Acid , Arch Biochem Biophys 39, 80, 1952

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